А Б В Г Д Е Є Ж З І Ї Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Ч Ш Щ Ю Я
Концентрація - білок
Концентрація білка, при якій висота подвійної хвилі досягає межі залежить від природи білка.
Концентрація білків і нуклеїнових кислот в цих крапельних набагато вище, ніж у вихідному розчині і крапельки коацервата мають набагато більш високу ступінь організації. Крім того, при додаванні ферменту відбувається його виборча адсорбція на крапельках коацервата, де фермент стає більш активним, ніж в розчині. Це дуже цікаво, оскільки те ж саме спостерігається в живих клітинах, однак в даному випадку це відбувається в набагато простіший системі.
Концентрація білків у лімфі і тканинної рідини (в середньому 332%) приблизно вдвічі менше концентрації білків в плазмі так як на відміну від сечовини, Сахаров, амінокислот і деяких неорганічних іонів білки не переносяться через стінки клітин. Є дані що вказують на те, що в лімфоїдних тканинах відбувається синтез глобулиновой фракції білка.
Залежність висоти подвійної хвилі білка від. Концентрація білка, при якій висота подвійної хвилі досягає межі залежить від природи білка.
Концентрація загальних білків плазми піддається відносно невеликим змінам. Слабке їх зменшення відзначається протягом першого періоду після опромінення. Фракції аг, а2 - і р-глобуліну збільшуються. Таким чином, ставлення глобулін /альбумін виявляється вищим за норму.
Концентрацію білка в пробі визначають по оптичної щільності за допомогою калібрувальної кривої. Калібровану криву будують на підставі ряду точно приготованих білкових розчинів низхідній концентрації. У тих випадках, коли необхідно отримати правильне уявлення про абсолютному змісті білка, для побудови калібрувальної кривої слід брати кристалічний.
Концентрацію білків розраховують за стандартним графіком. У 8 градуювальних пробірок з мікробюретки доливають стільки стандартного розчину білка, щоб в пробірках відповідно містилося 001; 002; 005; 010; 015; 020; 025; 030 мг білка.
Концентрацію білка визначають за градуювальним графіком (зазвичай з невеликими відхиленнями від лінійної залежності), побудованому за допомогою відповідного стандартного білка. Різні білки дають помітно різняться величини поглинання в методі Лоурі-Фолина, почасти це залежить від змісту тирозину і триптофану.
Визначення концентрації білка проводять методом Лоурі (с. При спектрофотометричному визначенні для розрахунку використовують коефіцієнт Л1% 1СМ10 2 при 280 нм.
Зменшення концентрації білків в плазмі пов'язано з їх незворотною затримкою на целофановій мембрані.
Зниження концентрації білка в разі олігомерних НАД-залежних дегідрогеназ призводить до дисоціації цих ферментів на димери, і подальша іммобілізація таких препаратів не дозволяє отримати пов'язані з матрицею тетрамери дегидрогеназ.
Залежність межі міцності ( РГВ, дии /с. м і рівноважного напруги зсуву (- Р я, дин /см від градієнта швидкості (е, сек 1 для межфазаих адсорбційних шарів білків і полімерів на кордоні з бензолом при 20 С. Збільшення концентрації білка в розчині призводить до зростання величин меж міцності і рівноважного напруги зсуву, якими характеризуються міжфазні шари. Реологические криві (рис. 41) отримані з залежностей е (т) і Ps (т) і для всіх впавши мають однаковий вигляд.
Оцінка концентрації плазматичного білка і електро-форетічеського моделі: гепатоцеллюлярное пошкодження супроводжується падінням концентрації плазматичного альбуміну і характерним підвищенням рівня вмісту фракцій глобуліну, особливо у-глобуліну. Ці зміни формують основу для флокуляційно тестування функції печінки.
Седиментація яєчного альбуміну в відцентровому полі в 400000 разів перевищує прискорення сили тяжіння (73500 об /хв. Час між знімками 5 хвилин. Молярная ж концентрація білків та інших високомолекулярних сполук в розчинах навіть з високим відсотковим вмістом речовини дуже низька.
Криві 8 (Р і TS (P для міжфазних адсорбційних сдоев желатини (про і лізоциму (б на кордоні водний розчин білка /бензол при різних концентраціях білка в обсязі (20 С. З підвищенням концентрації білка зростає число зв'язків в структурі межфазного адсорбційного шару і знижується довжина незакріплених ділянок макромолекул.
Для визначення концентрації білка методом Лоурі необхідно попередньо осадити його трихлороцтової кислотою (с. Спектрофотометричне вимірювання можна проводити за умови, коли з розчину фосфорілази видалений АМФ, при цьому відношення ЛгеоМазо дорівнює 052 - 055; для розрахунку використовують коефіцієнт А10 /1см 13 2 при 280 нм .
При підвищенні концентрації білків або інших речовин що містять сульфгідрильні або дисульфидную угруповання, висота каталітичної хвилі зростає до певної межі при цьому співвідношення між першою і другою хвилями зі збільшенням концентрації білкових молекул змінюється. На висоту каталітичної хвилі впливає і концентрація кобальту.
У елюаті визначають концентрацію білка і ферментативну активність. Фракції, що містять фосфоглюкому-тазу, об'єднують і білок концентрують додаванням сульфату амонію до 75% насичення.
У загальному випадку збільшення концентрації білка в обсязі повинно було б приводити до зростання числа елементів структури в шарі а також числа контактів між ними, що ускладнює швидку реакцію елементів структури шару на докладені ззовні напруги і отже, уповільнює розвиток еластичних деформацій в шарах і їх перебіг. Результати реологічних досліджень міжфазних шарів желатин цілком узгоджуються з цим положенням. Величини реологічних параметрів міжфазних шарів зростають при підвищенні концентрації желатини в водної фазі.
Збільшення молекулярної ваги при концентраціях білка нижче максимуму можна приписати процесу самоасоціації, проте зменшення молекулярної ваги при більш високих концентраціях не може бути за рахунок констант рівноваги, завжди мають позитивний знак. Таким чином, зниження молекулярних ваг відбувається завдяки ефектам неідеальної.
Повільний пік при всіх концентраціях білка, що перевищують 175 мг /мл, має постійну площею.
Метод смуг для спостереження положення кордону в електрофор тическом посудині. хоча товщина темних смуг пропорційна концентрації білка, все ж цим методом можна отримати точних даних про відносні концентраціях компонентів.
При ультрафільтрації плазми в штучній нирці концентрація білків в ній зменшується.
Умовно прийнято вважати, що при концентрації білка в розчині що дорівнює 1 мг /мл, величина оптичної щільності при 280 нм дорівнює 1 при використанні кювети з товщиною шару 10 мм.
Ці всі явища можуть бути наслідком збільшення концентрації білка в водної фазі. Механізм утворення міжфазних шарів глобулярних білків, природно, вимагає додаткового вивчення.
З фільтратом проробляють кольорові реакції і визначають концентрацію білка.
Ізоелектрична точка не залежить в явному вигляді від концентрації білка; для ізоіонной точки, як показує рівняння (V. Зі зменшенням концентрації білка невідповідність між ізоіонной і ізоелектрічен-ськими точками збільшується.
Навпаки, Ізоелектрична значення рН не залежить від концентрації білка, оскільки рівняння (30 - 1) не залежить від концентрації. Наближені розрахунки попередніх розділів були засновані саме на цьому припущенні. На практиці воно підтверджується не завжди в зв'язку з електростатичним взаємодією між іонами білка.
Аналогічну обробку повторюють до тих пір, поки концентрація білка в ферментному розчині не знизиться до 6 - 8 мг /мл. На даній стадії ферментний розчин може зберігатися в замороженому стані протягом декількох тижнів без втрати транскетолазной активності.
Біуретова реакція також може бути використана для визначення концентрації білка, оскільки за допомогою цієї реакції виявляються пептидні зв'язку, середнє число яких на одиницю ваги білка для більшості білків приблизно однаково.
Очевидно, що прямо пропорційна залежність розчинності вуглеводнів від концентрації білка, зазначена в роботі[97], Може вважатися загальною властивістю глобулярних білків, що характеризує процес внутріглобу-лярного зв'язування неполярних речовин.
На рис. 101 наведено залежності швидкого часу релаксації від концентрації білка при двох різних тисках.
Швидкість ультрафільтрації плазми не залежить від її в'язкості (концентрації білків) і зростає в міру ультрафільтрації.
Осад розчиняють у невеликій кількості бидистиллированной води, щоб концентрація білка дорівнювала 20 - 25 мг /мл. Осад розчиняють у невеликому об'ємі води.
Залежність показника заломлення водного розчину пепсину (з 0 5 г /ЮО мл. РН 3 0. 20 С від временя при різних добавках бензолу. | Залежність розчинності бензолу (5 у водних розчинах глобулярних білків від концентрації білка (с при 20 С (ізоелек- тріческого стан. | Залежність розчинності бензолу (за вирахуванням розчинності в воді в розчинах білків від концентрації білка при 20 С (ізоелектрична стан. Очевидно, що лінійну залежність величин розчинності бензолу від концентрації білків в розчині слід вважати загальним властивістю глобулярних білків, що характеризує процес внутріглобулярного зв'язування бензолу.
Зміна питомої оптичного обертання розчинів і гелів желатину в часі для різних концентрацій і температур (рН 4 9. | Залежність температурного коефіцієнта питомого оптичного обертання розчинів і гелів желатину в ізоалектріческом стані від температури. Зростання швидкості зміни[а ]х зі збільшенням концентрації білка в розчинах дозволяє вважати, що цей процес визначається в основному міжмолекулярними взаємодіями, а не утворенням індивідуальної спіралі стабилизованной внутрішньомолекулярними зв'язками. Швидкість процесу при цьому визначається, що збільшується з ростом концентрації ймовірністю ефективних зіткнень молекул в розчині желатини. Ефективними, очевидно, будуть зіткнення, що призводять до утворення ділянки з коллагенополобной потрійний спіраллю, утвореною взаємодією трьох (поліпептидних ланцюгів. . Коротко описують умови екстракції гемоглобіну; обчислюють і записують концентрацію білка в розчині. Слід зазначити, що співвідношення між осмотичним тиском і концентрацією білка часто дають відхилення від лінійної залежності.
Розрахунок ведуть за формулою: Con-AouF, де Соп - концентрація білка в пробі. Якщо вміст білка в сироватці більше 100 г /л, її розводять фізіологічним розчином, а при розрахунках ступінь розведення враховується. Цей метод не використовують для визначення кількості білка в сечі або спинномозкової рідини.
метод заснований на зміні забарвлення специфічного барвника в залежності від концентрації білка. при класичному кількісному визначені по Кьельдалю аналітична проба руйнується при кип'ятінні з концентрованої сірчаної кислоти в присутності каталізатора , причому органічно пов'язаний азот утворює еквівалентну кількість сульфату амонію.
Інтенсивність забарвлення залежить від кількості серусодер-службовців амінокислот у білку і від концентрації білка в розчині.
Якщо при розчиненні речовини відбувається зниження діелектричної постійної розчину, то концентрація білка поблизу іона солі знижується і відбувається процес висолювання, який залежить від концентрації іонів.
Зміна 1 катали-тичної хвилі в залежності від часу накопичення сироватковогоальбуміну на. | Зміна II каталітичної хвилі від часу накопичення сироватковогоальбуміну (-]/Т для його концентрацій (мкг /мл. Таким чином, характер зміни ємності подвійного шару в залежно-сті від концентрації білка і часу його накопичення на електроді при невеликих ступенях заповнення відповідає закону швидкої і незворотною - адсорбції при дифузійному обмеження.
Перльман і Кауфман досліджували електрофорез сироватки людської крові в залежності від концентрації білка і від іонної фортеці розчину.
V l і /о одно V lo, С - концентрація білка в грамах на 100 см3 розчину . Трефферс висловлює концентрацію в грамах на 100 см3 розчинника. Можна очікувати, однак, що найкраще співвідношення буде отримано при вираженні концентрації щодо обсягу розчину, а не щодо обсягу розчинника.
на ступінь зв'язування двузарядних катіонів в біологічних рідинах впливають рН, концентрація білка і самого катіона, інших іонів (іонна сила розчину), функціональна активність ендокринної системи та ін. Ці питання мають велике значення для клініки внутрішніх хвороб, створюючи передумови цілеспрямованого патогенетичного лікування. Однак наші знання про активність іонів і факторах, їх визначають, недостатні. Це в значній мірі обумовлено труднощами теоретичного і експериментального плану.
Швидкість накопичення коллагеноподобних ділянок у водних расвор желатин істотно залежить від концентрації білка.
Рівняння (30 - 6) показує, що при зменшенні концентрації білка в ізоіонном розчині Z буде збільшуватися. Іншими словами, не існує єдиного ізоіонного значення рН, воно залежить від концентрації. При бажанні можна обчислити його значення, спільно вирішуючи рівняння (30 - 1) і (30 - 6) за умови Сп Сон - /СШ. Розчини, з якими ми маємо справу, містять зазвичай настільки низькі концентрації іонів, що замість активностей можна підставити концентрації.
Визначення кількості субодиниць, що вступили в реакцію, проводиться шляхом порівняння концентрації иммобилизованного білка та й після обробки 8 М сечовиною. Зниження концентрації білка в суспензії агарози після інкубації в мочевине в 4 рази дозволяє використовувати препарат ЛДГ для отримання мономера. Видалення сечовини з системи при промиванні буфером веде одночасно і до видалення диссоциированного субодиниць. Що залишається пов'язаним білок є мономером ЛДГ, який використовується для подальших досліджень.
Концентрація білків і нуклеїнових кислот в цих крапельних набагато вище, ніж у вихідному розчині і крапельки коацервата мають набагато більш високу ступінь організації. Крім того, при додаванні ферменту відбувається його виборча адсорбція на крапельках коацервата, де фермент стає більш активним, ніж в розчині. Це дуже цікаво, оскільки те ж саме спостерігається в живих клітинах, однак в даному випадку це відбувається в набагато простіший системі.
Концентрація білків у лімфі і тканинної рідини (в середньому 332%) приблизно вдвічі менше концентрації білків в плазмі так як на відміну від сечовини, Сахаров, амінокислот і деяких неорганічних іонів білки не переносяться через стінки клітин. Є дані що вказують на те, що в лімфоїдних тканинах відбувається синтез глобулиновой фракції білка.
Залежність висоти подвійної хвилі білка від. Концентрація білка, при якій висота подвійної хвилі досягає межі залежить від природи білка.
Концентрація загальних білків плазми піддається відносно невеликим змінам. Слабке їх зменшення відзначається протягом першого періоду після опромінення. Фракції аг, а2 - і р-глобуліну збільшуються. Таким чином, ставлення глобулін /альбумін виявляється вищим за норму.
Концентрацію білка в пробі визначають по оптичної щільності за допомогою калібрувальної кривої. Калібровану криву будують на підставі ряду точно приготованих білкових розчинів низхідній концентрації. У тих випадках, коли необхідно отримати правильне уявлення про абсолютному змісті білка, для побудови калібрувальної кривої слід брати кристалічний.
Концентрацію білків розраховують за стандартним графіком. У 8 градуювальних пробірок з мікробюретки доливають стільки стандартного розчину білка, щоб в пробірках відповідно містилося 001; 002; 005; 010; 015; 020; 025; 030 мг білка.
Концентрацію білка визначають за градуювальним графіком (зазвичай з невеликими відхиленнями від лінійної залежності), побудованому за допомогою відповідного стандартного білка. Різні білки дають помітно різняться величини поглинання в методі Лоурі-Фолина, почасти це залежить від змісту тирозину і триптофану.
Визначення концентрації білка проводять методом Лоурі (с. При спектрофотометричному визначенні для розрахунку використовують коефіцієнт Л1% 1СМ10 2 при 280 нм.
Зменшення концентрації білків в плазмі пов'язано з їх незворотною затримкою на целофановій мембрані.
Зниження концентрації білка в разі олігомерних НАД-залежних дегідрогеназ призводить до дисоціації цих ферментів на димери, і подальша іммобілізація таких препаратів не дозволяє отримати пов'язані з матрицею тетрамери дегидрогеназ.
Залежність межі міцності ( РГВ, дии /с. м і рівноважного напруги зсуву (- Р я, дин /см від градієнта швидкості (е, сек 1 для межфазаих адсорбційних шарів білків і полімерів на кордоні з бензолом при 20 С. Збільшення концентрації білка в розчині призводить до зростання величин меж міцності і рівноважного напруги зсуву, якими характеризуються міжфазні шари. Реологические криві (рис. 41) отримані з залежностей е (т) і Ps (т) і для всіх впавши мають однаковий вигляд.
Оцінка концентрації плазматичного білка і електро-форетічеського моделі: гепатоцеллюлярное пошкодження супроводжується падінням концентрації плазматичного альбуміну і характерним підвищенням рівня вмісту фракцій глобуліну, особливо у-глобуліну. Ці зміни формують основу для флокуляційно тестування функції печінки.
Седиментація яєчного альбуміну в відцентровому полі в 400000 разів перевищує прискорення сили тяжіння (73500 об /хв. Час між знімками 5 хвилин. Молярная ж концентрація білків та інших високомолекулярних сполук в розчинах навіть з високим відсотковим вмістом речовини дуже низька.
Криві 8 (Р і TS (P для міжфазних адсорбційних сдоев желатини (про і лізоциму (б на кордоні водний розчин білка /бензол при різних концентраціях білка в обсязі (20 С. З підвищенням концентрації білка зростає число зв'язків в структурі межфазного адсорбційного шару і знижується довжина незакріплених ділянок макромолекул.
Для визначення концентрації білка методом Лоурі необхідно попередньо осадити його трихлороцтової кислотою (с. Спектрофотометричне вимірювання можна проводити за умови, коли з розчину фосфорілази видалений АМФ, при цьому відношення ЛгеоМазо дорівнює 052 - 055; для розрахунку використовують коефіцієнт А10 /1см 13 2 при 280 нм .
При підвищенні концентрації білків або інших речовин що містять сульфгідрильні або дисульфидную угруповання, висота каталітичної хвилі зростає до певної межі при цьому співвідношення між першою і другою хвилями зі збільшенням концентрації білкових молекул змінюється. На висоту каталітичної хвилі впливає і концентрація кобальту.
У елюаті визначають концентрацію білка і ферментативну активність. Фракції, що містять фосфоглюкому-тазу, об'єднують і білок концентрують додаванням сульфату амонію до 75% насичення.
У загальному випадку збільшення концентрації білка в обсязі повинно було б приводити до зростання числа елементів структури в шарі а також числа контактів між ними, що ускладнює швидку реакцію елементів структури шару на докладені ззовні напруги і отже, уповільнює розвиток еластичних деформацій в шарах і їх перебіг. Результати реологічних досліджень міжфазних шарів желатин цілком узгоджуються з цим положенням. Величини реологічних параметрів міжфазних шарів зростають при підвищенні концентрації желатини в водної фазі.
Збільшення молекулярної ваги при концентраціях білка нижче максимуму можна приписати процесу самоасоціації, проте зменшення молекулярної ваги при більш високих концентраціях не може бути за рахунок констант рівноваги, завжди мають позитивний знак. Таким чином, зниження молекулярних ваг відбувається завдяки ефектам неідеальної.
Повільний пік при всіх концентраціях білка, що перевищують 175 мг /мл, має постійну площею.
Метод смуг для спостереження положення кордону в електрофор тическом посудині. хоча товщина темних смуг пропорційна концентрації білка, все ж цим методом можна отримати точних даних про відносні концентраціях компонентів.
При ультрафільтрації плазми в штучній нирці концентрація білків в ній зменшується.
Умовно прийнято вважати, що при концентрації білка в розчині що дорівнює 1 мг /мл, величина оптичної щільності при 280 нм дорівнює 1 при використанні кювети з товщиною шару 10 мм.
Ці всі явища можуть бути наслідком збільшення концентрації білка в водної фазі. Механізм утворення міжфазних шарів глобулярних білків, природно, вимагає додаткового вивчення.
З фільтратом проробляють кольорові реакції і визначають концентрацію білка.
Ізоелектрична точка не залежить в явному вигляді від концентрації білка; для ізоіонной точки, як показує рівняння (V. Зі зменшенням концентрації білка невідповідність між ізоіонной і ізоелектрічен-ськими точками збільшується.
Навпаки, Ізоелектрична значення рН не залежить від концентрації білка, оскільки рівняння (30 - 1) не залежить від концентрації. Наближені розрахунки попередніх розділів були засновані саме на цьому припущенні. На практиці воно підтверджується не завжди в зв'язку з електростатичним взаємодією між іонами білка.
Аналогічну обробку повторюють до тих пір, поки концентрація білка в ферментному розчині не знизиться до 6 - 8 мг /мл. На даній стадії ферментний розчин може зберігатися в замороженому стані протягом декількох тижнів без втрати транскетолазной активності.
Біуретова реакція також може бути використана для визначення концентрації білка, оскільки за допомогою цієї реакції виявляються пептидні зв'язку, середнє число яких на одиницю ваги білка для більшості білків приблизно однаково.
Очевидно, що прямо пропорційна залежність розчинності вуглеводнів від концентрації білка, зазначена в роботі[97], Може вважатися загальною властивістю глобулярних білків, що характеризує процес внутріглобу-лярного зв'язування неполярних речовин.
На рис. 101 наведено залежності швидкого часу релаксації від концентрації білка при двох різних тисках.
Швидкість ультрафільтрації плазми не залежить від її в'язкості (концентрації білків) і зростає в міру ультрафільтрації.
Осад розчиняють у невеликій кількості бидистиллированной води, щоб концентрація білка дорівнювала 20 - 25 мг /мл. Осад розчиняють у невеликому об'ємі води.
Залежність показника заломлення водного розчину пепсину (з 0 5 г /ЮО мл. РН 3 0. 20 С від временя при різних добавках бензолу. | Залежність розчинності бензолу (5 у водних розчинах глобулярних білків від концентрації білка (с при 20 С (ізоелек- тріческого стан. | Залежність розчинності бензолу (за вирахуванням розчинності в воді в розчинах білків від концентрації білка при 20 С (ізоелектрична стан. Очевидно, що лінійну залежність величин розчинності бензолу від концентрації білків в розчині слід вважати загальним властивістю глобулярних білків, що характеризує процес внутріглобулярного зв'язування бензолу.
Зміна питомої оптичного обертання розчинів і гелів желатину в часі для різних концентрацій і температур (рН 4 9. | Залежність температурного коефіцієнта питомого оптичного обертання розчинів і гелів желатину в ізоалектріческом стані від температури. Зростання швидкості зміни[а ]х зі збільшенням концентрації білка в розчинах дозволяє вважати, що цей процес визначається в основному міжмолекулярними взаємодіями, а не утворенням індивідуальної спіралі стабилизованной внутрішньомолекулярними зв'язками. Швидкість процесу при цьому визначається, що збільшується з ростом концентрації ймовірністю ефективних зіткнень молекул в розчині желатини. Ефективними, очевидно, будуть зіткнення, що призводять до утворення ділянки з коллагенополобной потрійний спіраллю, утвореною взаємодією трьох (поліпептидних ланцюгів. . Коротко описують умови екстракції гемоглобіну; обчислюють і записують концентрацію білка в розчині. Слід зазначити, що співвідношення між осмотичним тиском і концентрацією білка часто дають відхилення від лінійної залежності.
Розрахунок ведуть за формулою: Con-AouF, де Соп - концентрація білка в пробі. Якщо вміст білка в сироватці більше 100 г /л, її розводять фізіологічним розчином, а при розрахунках ступінь розведення враховується. Цей метод не використовують для визначення кількості білка в сечі або спинномозкової рідини.
метод заснований на зміні забарвлення специфічного барвника в залежності від концентрації білка. при класичному кількісному визначені по Кьельдалю аналітична проба руйнується при кип'ятінні з концентрованої сірчаної кислоти в присутності каталізатора , причому органічно пов'язаний азот утворює еквівалентну кількість сульфату амонію.
Інтенсивність забарвлення залежить від кількості серусодер-службовців амінокислот у білку і від концентрації білка в розчині.
Якщо при розчиненні речовини відбувається зниження діелектричної постійної розчину, то концентрація білка поблизу іона солі знижується і відбувається процес висолювання, який залежить від концентрації іонів.
Зміна 1 катали-тичної хвилі в залежності від часу накопичення сироватковогоальбуміну на. | Зміна II каталітичної хвилі від часу накопичення сироватковогоальбуміну (-]/Т для його концентрацій (мкг /мл. Таким чином, характер зміни ємності подвійного шару в залежно-сті від концентрації білка і часу його накопичення на електроді при невеликих ступенях заповнення відповідає закону швидкої і незворотною - адсорбції при дифузійному обмеження.
Перльман і Кауфман досліджували електрофорез сироватки людської крові в залежності від концентрації білка і від іонної фортеці розчину.
V l і /о одно V lo, С - концентрація білка в грамах на 100 см3 розчину . Трефферс висловлює концентрацію в грамах на 100 см3 розчинника. Можна очікувати, однак, що найкраще співвідношення буде отримано при вираженні концентрації щодо обсягу розчину, а не щодо обсягу розчинника.
на ступінь зв'язування двузарядних катіонів в біологічних рідинах впливають рН, концентрація білка і самого катіона, інших іонів (іонна сила розчину), функціональна активність ендокринної системи та ін. Ці питання мають велике значення для клініки внутрішніх хвороб, створюючи передумови цілеспрямованого патогенетичного лікування. Однак наші знання про активність іонів і факторах, їх визначають, недостатні. Це в значній мірі обумовлено труднощами теоретичного і експериментального плану.
Швидкість накопичення коллагеноподобних ділянок у водних расвор желатин істотно залежить від концентрації білка.
Рівняння (30 - 6) показує, що при зменшенні концентрації білка в ізоіонном розчині Z буде збільшуватися. Іншими словами, не існує єдиного ізоіонного значення рН, воно залежить від концентрації. При бажанні можна обчислити його значення, спільно вирішуючи рівняння (30 - 1) і (30 - 6) за умови Сп Сон - /СШ. Розчини, з якими ми маємо справу, містять зазвичай настільки низькі концентрації іонів, що замість активностей можна підставити концентрації.
Визначення кількості субодиниць, що вступили в реакцію, проводиться шляхом порівняння концентрації иммобилизованного білка та й після обробки 8 М сечовиною. Зниження концентрації білка в суспензії агарози після інкубації в мочевине в 4 рази дозволяє використовувати препарат ЛДГ для отримання мономера. Видалення сечовини з системи при промиванні буфером веде одночасно і до видалення диссоциированного субодиниць. Що залишається пов'язаним білок є мономером ЛДГ, який використовується для подальших досліджень.