А   Б  В  Г  Д  Е  Є  Ж  З  І  Ї  Й  К  Л  М  Н  О  П  Р  С  Т  У  Ф  Х  Ц  Ч  Ш  Щ  Ю  Я 


Альдолази

Альдолази а-розщеплює гексозодіфосфат на дві фосфотріози: діоксіацетонфосфат і гліцерінальдегідфосфат. Вона широко поширена в тканинах тварин і рослин, а також в мікроорганізмах. Кількість її в скелетних м'язах кролика досягаємайже 5% від усього розчинного у воді білка. Виділений з м'язів Барановським міоген А виявився альдолазой. Альдолазная активність Міогена м'язів встановлена ??Енгельгардтом. М'язова і дріжджова альдолази, звані також зімогексазой, відрізняються одна від одної тільки взасобах інактивації.

Альдолаза зустрічається в різних органах і тканинах людини і тварин. Зміст її в сироватці крові здорових людей незначно, а при хворобі Боткіна різко підвищується за рахунок виходу цього ферменту в кров з клітин печінки.

Альдолаза містить вільні SH-групи; деякі з них відіграють важливу роль у каталітичної активності, але основна їх функція полягає у підтримці нативної структури. До складу активного центру входять дві е-аміногрупи залишків лізину. Їх функція полягає вздійсненні зв'язку ферменту з одним із субстратів (діоксіацетонфосфатом) шляхом утворення проміжного з'єднання типу підстави Шиффа.

Альдолаза відноситься до класу альдегід-ЛіАЗ. Реакція розщеплення - супроводжується утворенням подвійного зв'язку.

Альдолаза каталізує реакцію розщеплення фруктозо-1 6-ді-фосфату на 3-фосфогліцеріновий альдегід і фосфодіоксіацетон.

Альдолаза відіграє важливу роль у процесах обміну речовин.

Активність альдолази з Aspergillus niger, що бере участь в утворенні лимонної кислоти,пригнічується 2 2 - ДП.

Виділення альдолази з скелетних м'язів кролика і вивчення її властивостей в розчинній і іммобілізованих стані.

Активність альдолази може бути виміряна двома методами: хімічним, заснованим на визначенні концентрації продуктів реакції- Фосфотріоз (по наростанню щелочнолабільного фосфору), і ензиматичними, в сполученої системі, що містить крім альдолази і фруктозо-1 6-дифосфату також НАД і гліцеральдегід-3 - фосфат-дегідрогенази або НАДН і гліцерол-3 - фосфатдегідрогенази. Швидкість альдолазноіреакції визначають по наростанню або убутку НАДН.

Седиментаційних діаграми а-амілази Bacillus subtilis з різним вмістом цинку. М'язова альдолаза з Ml60000 диссоциирует на холоду в лужному боратному буфері при-р Н 12 травня[132]і рН2[52]на поліпептидні ланцюги. Але якщонативні молекули цього ферменту інкубувати при лужних умовах та температурі 20 С, то поліпептидні ланцюги зазнають швидку деградацію, яка в кінцевому підсумку призводить до появи і накопичення щелочноустойчівого матеріалу.

У альдолази є вільніSH-групи, з яких деякі необхідні для прояву каталітичної активності.

Ці форми альдолази мають різну локалізацію.

Відбувається активація альдолази і амінофераз сироватки, змінюється активність моноамінооксидази, порушується білковий іамінокислотний обмін.

Нарешті, альдолаза, як про це згадувалося вище, каталізує дей-теріевий або тритієвої обмін тільки між одним з атомів водню діоксіацетонфосфата і розчинником.

Зовсім інший тип альдолази (альдолази класу II) виділеноз мікроорганізмів.

Саме під впливом альдолази фруктозодіфосфат дає глііеральдегід-3 - фосфат і фосфодіоксіацетон. Гліцеральдегід-3 - фосфат, реагуючи з ортофосфорної кислотою і окисленої формою ДПН (кофер-ментом дегідрази), перетворюється в 13-дифосфогліцеринової кислоти.

Якщо молекула нативної альдолази містить кілька поліпептидних ланцюгів, диссоциирующих при денатурації, то як ви можете прокоментувати цей результат.

Під дією ферменту альдолази (активується іонами Zn2 СО2 і Са2)фруктозе-1 6-дифосфат розпадається на дві фосфотріози - 3-фосфогліце-ріновий альдегід і фосфодіоксіацетон.

Описано також і інші альдолази, що відносяться до класу II. Деякі з цих ферментів є аналогами ФДФ-альдоль-зи з дріжджів, так як вони потребуютьдодаванні іонів металу тільки після тривалого діалізу проти ЕДТА. Природний іон металу, присутній у цих ферментах, досі невизначений. Однак деякі інші альдолази класу І, які утворюють менш стійкі подвійні комплекси Е - М2 як,наприклад, у випадку ФДФ-альдолази з С. Цим ферментом необхідна активація додаванням М2 і, хоча зазвичай прийнято вважати, що до них застосуємо механізм, зображений на рис. 14.6[289а ], В даний час немає доказів правильності такого припущення. Однак цей критерійнеоднозначно демонструє роль М2 в каталізі, так як ослаблення інгібування може протікати в першу чергу завдяки видаленню ЕДТА у вигляді комплексу з металом, а не в результаті відновлення активності при комплексоутворенні М2 з апоферментом.

Представником альдегідліаз є альдолаза.

Отже, молекула нативної альдолази повинна бути тетрамер. Утворені субодиниці поводяться однаково при ультрацентріфугірованія і не розділяються при електрофорезі. Крім того, було показано, щокожна з цих субодиниць має на С-кінці тирозин. Все це говорить про те, що субодиниці, складові молекулу альдолази, ідентичні або, у всякому разі, дуже схожі один з одним. Отже, дисоціація нативних молекул на субодиниці повинна супроводжуватисярозгортанням цих останніх.

Субстратна суміш для визначення альдолази, що містить фруктозе-1 6-дифосфат.

Дані про механізм дії альдолази будуть розглянуті пізніше (див. стор

Вивчення деяких властивостей иммобилизованной альдолази /Укр.

Вонине мають ні альдолази, ні глюкозо-6 - фосфатдегідрогенази, але містять активні фосфокетолази, що розщеплюють фруктозо-6 - фосфат і ксілуло-зо-5 - фосфат на ацетілфосфат і ерітрозо-4 - фосфат або гліцеральде-гід-3 - фосфат.

Дані по оптичному обертанню альдолази і ФГАД[59], Отримані для нативного та частково інактйвірованного радикалами ферменту, показують, що структура частково інактйвірованного ферменту стає більш жорсткою, ч то може обумовлювати втрату каталітичної активності.

Фосфотріози, що накопичилися піддією альдолази, переводяться в забарвлені сполуки дією гідразину та дінітрофенілгідразіна.

Утворився фруктозо-1 6-дифосфат під впливом альдолази розпадається на дві фосфотріози: 3-гліцерінальдегідфосфат і діоксіацетонфос-фат. Обидві вони пов'язанівзаємним перетворенням під впливом ізомерази. Равновесіе при цьому сильно зрушено в бік діоксіацетонфосфата. У який момент відбувається розкриття фуранозного кільця фруктози, не з'ясовано.

Зовсім інший тип альдолази (альдолази класу II) виділений змікроорганізмів.

Четверту реакцію гліколізу каталізує фермент альдолаза.

Залежність між ефектами о-фенантроліна і 8-оксихінолін. У кислому і лужному середовищі альдолаза[52, 132], Глутаматдегідрогенази[133-135], Каталаза[54]дисоціюють до субодиницьабо поліпептидних ланцюгів.

На рис. 1 показана порівняльна активність альдолази провідних і паренхімних тканин цукрових буряків.

З різних клітин були виділені і очищені альдолази декількох різних типів і властивості їх були вивчені. Найбільш ретельнодосліджена альдолаза з скелетних м'язів кролика. Активна форма ферменту являє собою тример, що складається з трьох поліпептидних ланцюгів.

Фосфогліцеріновий альдегід, що утворився в результаті дії альдолази на фруктозо - 6-дифосфат, піддається в тканинахокисленню в фосфогліцеріновую кислоту.

Боткіна), коли спостерігається підвищення активності альдолази.

Методичну основу роботи становить отримання іммобілізованого препарату альдолази, на якому адсорбується доданий ззовні розчинний білок.

Було показано, що ізоелектричної розчини денатурированной альдолази в суміші 6 М хлористого гуанідину і 0.1 М меркап-тоетанола при 25 С мають наступні осмотичні тиску.

Тварини тканини містять щонайменше три різні альдолази, характерні для м'яза,печінки і мозку відповідно. Всі альдолази розщеплюють фруктозо-1 6-бісфосфат до діоксіацетонфосфата і гліцеральдегід-3 - фосфату і можуть каталізувати зворотну конденсацію діоксіацетонфосфата з різними оксіальдегідамі, хоча і з неоднаковою швидкістю.

Начетвертому етапі в дію вступає фермент альдолаза. Це фермент розщеплення, і він глибоко змінює структуру вуглеводу. Ланцюжок із шести атомів вуглеводу, характерна для Гек-ство, розривається на дві ланки, що містять по три атома вуглецю, - виходять фосфорильованігліцериновий альдегід і діоксіацетон.

Як було встановлено, у тваринних організмах альдолаза присутня у вигляді форм А і В. Ці альдолази мають близьку молекулярну масу (близько 150000), схожий амінокислотний склад, але іншу послідовність амінокислот, хочадеякі частини їх молекули побудовані однаково. Альдолаза А диссоциирует в кислоті на чотири неактивні субодиниці, нейтралізація призводить до асоціації субодиниць з утворенням молекул, що володіють багатьма властивостями натівнога ферменту.

Расщепленіе фруктозо-16-дифосфату на дві фосфотріози каталізує альдолаза (К. При цьому утворюється гліцеральдегід-3 - фосфат і діоксіацетонфосфат. Альдолази м'язів не вимагає для прояву ферментативної активності іонів металів або яких-небудь-кофакторів. При дослідженні перетворенняфруктозо-1 6-дифосфату в якості джерела альдолази використовують діалізованние екстракти м'язів. В процесі діалізу з екстракту видаляються компоненти аден-ловою системи НАД і неорганічний фосфат, у відсутність яких стає неможливим подальше перетвореннягліцеральдегід-3 - фосфату під впливом гліцеральдегід-3 - фосфатдегідрогенази. Ферментативне розщеплення фрук-тозо-1 6-дифосфату оборотно, положення рівноваги з підвищенням температури зміщується в бік утворення фосфотріоз, константа рівноваги при цьому зростає.

Фермент 2-кето - 3-дезокси - 6-фосфоглюконатальдолаза відрізняється від альдолази фруктозодіфосфата і дезоксирибози, так як не діє на два останніх субстрату; тим не менш друга частина шляху, починаючи з альдолазного розщеплення, подібна з гліколітичні шляхом, тим більше, що продукти розщеплення 2-кето - 3-дезокси - 6-фосфоглюконата - піруват і гліцеральдегід-3 - фосфат зазнають, очевидно, звичайні перетворення.

Динаміка ваги кроликів при хронічному отруєнні а-метилстиролом н чотирьоххлористим вуглецем.

Активність трансами-наз (аспарагінової та ала-Нінов) і альдолази сироватки крові кролів не змінювалася протягом досвіду під впливом парів а-метілсті-рола.

В якості контролю використовують пробу, що містить замість розчину альдолази 0 1 М гліціновие буфер.

Однак Ваннер[16]не виявив гексокінази, фосфогексоізо-Мераз і альдолази під флоемном соку Robinia pseudacacia, на підставі чого зробив висновок про малу метаболічної активності сітовідних клітин цієї рослини. Слід, утім, зазначити, що Ваннер працював з вільним ексудатом, що випливають з сітовідних трубок, що не могло характеризувати обміну речовин цілих клітин.

Відповідь: а) 42000; б) нативная альдолаза містить чотири поліпептидні ланцюги.

Конваллотоксін) 207 p - L-Рамнопіранозід строфантідін 207 L-Рамнулозофосфат - альдолаза 378 L-Рамнулозофосфат - кіназа 378Распад вуглеводів 363 їв.

Наприклад, кристали Міогена А складаються з трьох різних білків: альдолази, дегідрогенази фосфогліцеральдегіда і три-озофосфатізомерази.

Елоді), що показали, що ряд важливих ферментів гліколізу - альдолаза, дегпдрогеназа фосфогліцерпнового альдегіду - посилюють свою дію при додаванні в середу деяких неводних розчинників (діметілформампда), специфічно впливають на третинну структуру білків (див. стор Цей результат показує, що вивчення ферментативного каталізу у водних розчинах може і не розкрити максимальної потенції ферменту як каталізатора певної реакції. При всьому тому вивчення кінетики ферментативної реакції є найбільш загальним методом дослідження ферментів.

Расщепленіе-фруктозо - 1 6-фосфату на гліцеральдегід-3 - фосфат і діоксіацетон каталізує фермент альдолаза (Г) - фруктозо-1 6-дифосфат - В-гліцеральдегід - 3-фос-фат - ЛіАЗ), який отримано з м'язів кроля.